Polvo rojo del Nilo, también conocido como rojo del Nilo en inglés, tiene la fórmula molecular C20H18N2O2, CAS7385-67-3 y un peso molecular de 318,37. Punto de fusión 203-205 grados C, punto de ebullición 484,7 ± 45,0 grados C a 760 mmHg, densidad 2,2330. Es un agente colorante lipófilo y resistente a la luz que emite una fuerte fluorescencia en ambientes hidrofóbicos (ricos en lípidos), con una fluorescencia mínima en medios acuosos. El compuesto aparece como un polvo rojo oscuro, soluble en agua (parcialmente miscible) y metanol (1 mg/ml). Insoluble en agua, soluble en diversos disolventes orgánicos y emisor de fluorescencia, con alta afinidad por los triglicéridos y el colesterol, lo que lo convierte en el tinte fluorescente lipídico más ideal en ambientes hidrófobos; El rojo del Nilo también puede unirse a los fosfolípidos para colorear la membrana celular; También se pueden teñir otras moléculas hidrófobas, como las proteínas hidrófobas.
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Fórmula química |
C20H18N2O2 |
Masa exacta |
318.14 |
Peso molecular |
318.38 |
m/z |
318.14 (100.0%), 319.14 (21.6%), 320.14 (2.2%) |
Análisis elemental |
C, 75.45; H, 5.70; N, 8.80; O, 10.05 |
Polvo rojo del Nilotiene propiedades fluorescentes y puede usarse como tinte fluorescente para teñir microplásticos, lípidos, proteínas, etc. Se usa comúnmente en microscopía de fluorescencia y citometría de flujo para detectar gotitas de lípidos intracelulares. A través de la tinción con rojo del Nilo y la observación por microscopía de fluorescencia de células bacterianas que contienen sustancias de almacenamiento de lípidos PHB y no PHB, se confirmó que el rojo del Nilo es un buen agente de tinción fluorescente para sustancias de almacenamiento de lípidos en células bacterianas con alta sensibilidad. Se puede utilizar para la observación por microscopía de fluorescencia de sustancias de almacenamiento de lípidos PHB y PHB, y puede distinguir los dos hasta cierto punto.
1. El método de tinción fluorescente con rojo del Nilo para la determinación de lípidos se ha aplicado a algunas especies de microalgas, pero no se puede utilizar en algunas algas verdes con paredes celulares gruesas debido a su dificultad de tinción. Los investigadores seleccionaron cuatro cepas de microalgas y mejoraron el método de medición de lípidos mediante tinción fluorescente con rojo del Nilo. Utilizaron una solución de dimetilsulfóxido al 20 % como penetrante y trataron previamente las células de algas a 35-40 grado para mejorar la unión del rojo del Nilo a los lípidos intracelulares; La DO540 de la densidad de células de algas está dentro del rango de 0.8-1.1. La adición de 15 μl de solución de acetona roja del Nilo con una concentración másica de 0,1 mg/ml para la tinción puede mejorar eficazmente la intensidad de la emisión de fluorescencia. Este método puede reflejar con precisión el contenido de lípidos intracelulares y puede usarse como un método de detección rápida para detectar ampliamente las algas verdes ricas en lípidos en la naturaleza.
2. Basado en el principio de que el rojo del Nilo se combina con componentes de aceite intracelular y emite fluorescencia bajo luz ultravioleta, y que la intensidad de la fluorescencia está relacionada con el contenido de aceite, se examinaron cepas de levadura de aguas profundas para determinar la producción de aceite cultivando levadura en un medio suplementado con Rojo Nilo y observando fluorescencia de la colonia. Se utilizó el método de análisis de secuencia de la región 26S rDNA D1/D2 para identificar las cepas de levadura productoras de aceite seleccionadas y se estableció un método rápido para medir el contenido de aceite mediante tinción con rojo Nilo.
3. El ácido hipoclórico (HOCl) desempeña un papel crucial en el sistema de defensa natural, pero niveles anormales de esta especie pueden provocar diversas enfermedades como daño celular y envejecimiento humano. Por lo tanto, el desarrollo de nuevas sondas fluorescentes para la detección no destructiva de HOCl en tejidos celulares en el campo de las ciencias biológicas es de gran importancia. Las actuales sondas de fluorescencia de excitación de dos fotones (TPEF) basadas en derivados del rojo del Nilo tienen las desventajas de una escasa solubilidad en agua y una baja eficiencia. Sobre la base de la introducción de un grupo alquilamina biciclado en la posición 9 del rojo del Nilo, se introduce una molécula sustituyente de fenilo fusionada (Nil-OH-6) en las posiciones 2 y 3. El valor de la sección transversal de absorción de dos fotones puede alcanzar hasta 243GM y el rendimiento cuántico es 0.49. Además, la modificación del extremo molecular de los derivados del rojo del Nilo con diferentes anillos heteroespiro o grupos amino fusionados con N,N-dialquilo puede mantener la alta eficiencia de fluorescencia de los derivados del rojo del Nilo como sondas de dos fotones al tiempo que mejora la solubilidad de las sondas. La estrategia de diseño propuesta en este estudio para mejorar la solubilidad teniendo en cuenta la eficiencia de la fluorescencia de las moléculas de la sonda proporciona una base teórica confiable y un nuevo enfoque para la síntesis posterior de sondas TPEF prácticas derivadas del rojo del Nilo.
4. El rojo del Nilo se puede utilizar para preparar láseres de tinte rojo del Nilo para la detección de ácidos, y esta investigación tiene amplias perspectivas de aplicación en campos como la detección bioquímica, la química láser y la tecnología de espectroscopia láser.
5. Utilice la tinción con rojo Nilo para ayudar rápidamente en la detección de microplásticos en muestras de ambientes acuáticos. En primer lugar, se preparó una solución de tinte rojo del Nilo a partir de una solución de rojo del Nilo y acetona, y se preparó una película orgánica teñida con tinta; En segundo lugar, antes de teñir, agregue la solución de tinte Nilo Red filtrada a través de una membrana orgánica a la muestra de agua para teñirla de azul claro; Filtrar la muestra de agua teñida utilizando una membrana orgánica teñida con tinta. Finalmente, coloque la membrana orgánica filtrada en un plato de cultivo y cubra uniformemente la membrana con pegamento para fijar las sustancias en la membrana para su posterior análisis y uso. El tinte preparado mediante este método es fácil y rápido de preparar, con buen efecto de adsorción y método de tinción sencillo. En comparación con la inspección visual directa, no solo consume menos tiempo y cuesta menos, sino que también elimina algunas interferencias de materiales no plásticos.
6. Las moléculas del rojo del Nilo tienen grandes anillos aromáticos y grupos aceptores de electrones que pueden formar enlaces de hidrógeno con moléculas de agua en el estado fundamental. Son particularmente sensibles al entorno de solubilización en la capa de barrera micelar del tensioactivo y exhiben fluorescencia dual en la solución acuosa de micelas de bromuro de dodeciltrimetilamonio, con longitudes de onda de emisión de 578 y 630 nm, respectivamente. El grado de disociación anti-ion de las micelas de dodecilsulfato de sodio es mayor que el de las micelas, lo que no solo aumenta la polaridad del entorno circundante del rojo del Nilo, sino que también aumenta el agua de solvatación, lo que resulta en un aumento de los enlaces de hidrógeno con el rojo del Nilo y una baja intensidad de fluorescencia. de micelas de bromuro de amonio. Sin embargo, promueve eficazmente la formación de estados excitados de transferencia de carga retorcida intramolecular, y su población puede llegar incluso a más del 98%. Sólo aparece un pico de fluorescencia a 634 nm en la superficie. La sensibilidad del rojo del Nilo al medio ambiente refleja bien la información estructural incompleta de la formación inicial de micelas por los tensioactivos, lo que lo convierte en una buena sonda para detectar el comportamiento de agregación de tales moléculas anfifílicas con fuertes interacciones.
Polvo rojo del Niloes un tinte fluorescente hidrofóbico selectivo que se utiliza para gotitas de lípidos intracelulares y lípidos neutros. El rojo Nilo exhibe una fuerte fluorescencia en todos los disolventes orgánicos, con colores de fluorescencia que van desde el amarillo dorado hasta el rojo intenso. Cabe señalar que las fuertes propiedades de fluorescencia del rojo del Nilo sólo existen en entornos hidrofóbicos. El rojo del Nilo es altamente soluble en los lípidos que pretende exhibir y no interactúa con ningún componente del tejido excepto en solución. Específicamente, las propiedades espectrales y fisicoquímicas del tinte lipofílico Nilo Red, rojo, provocan un cambio espectral de oro amarillo en su pico de emisión de excitación, lo que resulta en fluorescencia solo en ambientes ricos en lípidos en el espectro de emisión verde, y no en ambientes más polares.
Las moléculas de Rojo Nilo tienen grandes anillos aromáticos y grupos aceptores de electrones que pueden formar enlaces de hidrógeno con moléculas de agua en estado fundamental, lo que las hace particularmente sensibles al entorno de solubilización en las capas de barrera de micelas tensioactivas. Exhiben fluorescencia dual en soluciones acuosas de micelas de bromuro de dodecil trimetilamonio (C12TABr), con longitudes de onda de emisión máximas de 578 y 630 nm, respectivamente. El grado de disociación anti-ion de las micelas de dodecilsulfato de sodio (SDS) es mayor que el de las micelas C12TABr, lo que no solo aumenta la polaridad del entorno circundante del rojo del Nilo, sino que también aumenta el agua de solvatación, lo que resulta en un aumento de los enlaces de hidrógeno con el rojo del Nilo. y menor intensidad de fluorescencia que C12TABr. Sin embargo, promueve eficazmente la formación de estados excitados de transferencia de carga retorcida intramolecular (TICT), y su población puede incluso alcanzar más del 98%, con solo un pico de fluorescencia a 634 nm que aparece en la superficie. La sensibilidad de Nile Red al medio ambiente refleja la información estructural incompleta de los tensioactivos Gemini en la formación inicial de micelas, lo que lo convierte en una buena sonda para detectar el comportamiento de agregación de moléculas anfifílicas que interactúan fuertemente.
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