Pentagastrina CAS 5534-95-2

Secuencia objetivo: Boc- -Ala-Trp-Met-Asp-Phe-NH₂. Se adopta una estrategia de condensación secuencial AC-a-N terminal, con L-fenilalaninamida como material de partida C-terminal.

Se implementa una protección selectiva de la cadena lateral-para aminoácidos individuales: el grupo -carboxilo del ácido aspártico se protege mediante esterificación bencilo, la fracción indol del triptófano se somete a una protección suave y Boc se utiliza para la protección transitoria del grupo amino-.

Utilizando DCC/HOBt clásico como reactivos de condensación, el acoplamiento se produce a baja temperatura en DMF, con la incorporación secuencial de Asp, Met y Trp, seguida de la conjugación final con Boc- -alanina.

La hidrogenólisis a baja-temperatura posterior-a la-temperatura elimina los grupos protectores de la cadena lateral-a base de bencilo-y los grupos traza residuales Boc se escinden bajo un tratamiento suave con TFA.

El producto bruto concentrado se recristaliza en un sistema de disolventes mixtos de acetonitrilo-agua. Este proceso, que presenta una baja inversión de capital en equipos de producción, se adoptó ampliamente para la fabricación temprana de medicamentos a granel con un rendimiento general que oscilaba entre el 32% y el 38%. Sus principales inconvenientes incluyen un aislamiento intermedio engorroso y una descarga excesiva de residuos, lo que lleva a una sustitución gradual por tecnología de síntesis en fase sólida-.

Como soporte sólido se selecciona resina de cloruro de 2-clorotritilo (resina CTC). Primero se ancla Fmoc-Phe-NH₂ a la matriz de resina y los sitios de resina reactiva desocupados se tapan con metanol.

Con DMF como medio de reacción, la desprotección de Fmoc se completa con piperidina y la activación de carboxilo se realiza con HBTU/HOBt. Fmoc-Asp(OBzl), Fmoc-Met y Fmoc-Trp se acoplan secuencialmente desde el extremo C-hacia el extremo N-, y el terminal Boc- -Ala (Fmoc-libre) se introduce en el paso final.

La escisión de la resina y la desprotección global de las cadenas laterales- se realizan a temperatura ambiente con un cóctel de escisión de TFA; la resina se elimina mediante filtración y el filtrado concentrado se somete a purificación por HPLC preparativa en fase inversa-en una columna C18 con elución en gradiente de acetonitrilo-agua, seguido de liofilización para proporcionar materia prima farmacéutica a granel de alta-pureza con una pureza mayor o igual al 98,5 % y un rendimiento total entre el 52 % y el 60 %.

Este método presenta reacciones secundarias mínimas y una purificación sencilla, cumpliendo con las especificaciones de fabricación para ingredientes farmacéuticos activos de grado farmacopea-. En los últimos años, los procedimientos optimizados-respetuosos con el medio ambiente que adoptan reactivos de escisión-libres de flúor han reducido drásticamente la contaminación del agua-residual y se han convertido en la tecnología de producción preferida por los fabricantes farmacéuticos de todo el mundo.

En 1905, el fisiólogo británico Edkins propuso la hipótesis de que la mucosa ventricular antral secreta gastrina, un factor humoral que modula la producción de ácido del estómago a través de la circulación sanguínea.

Esta hipótesis, restringida por tecnologías de purificación insuficientes, siguió siendo controvertida y sin demostrar durante casi medio siglo. En 1926, el fisiólogo chino Lin Kesheng validó la existencia de sustancias endocrinas gastrointestinales mediante experimentos con animales y complementó el marco fisiológico de la hipótesis de la gastrina, pero la gastrina monomérica nativa no fue aislada.

No fue hasta 1959 que Gregory y Tracy de la Universidad de Liverpool, Reino Unido, purificaron la gastrina heptadecapéptido G17 natural de la mucosa antral porcina utilizando distribución a contracorriente y cromatografía en gel Sephadex. Su verificación de su actividad estimulante del ácido-sentó sólidas bases químicas y fisiológicas para la investigación de la gastrina.

En 1964, el mismo equipo de investigación terminó la secuenciación completa de aminoácidos del G17. La síntesis segmentaria y el cribado confirmaron que el tetrapéptido C-terminal Trp-Met-Asp-Phe-NH₂ constituye el núcleo farmacofórico, conservando completamente la capacidad de unión al receptor-de la gastrina nativa y la actividad estimulante del ácido-del estómago, mientras que la larga cadena de aminoácidos N-terminal solo regula Metabolismo in-vivo sin función farmacológica esencial.

En el contexto de una demanda clínica urgente de reactivos de diagnóstico estandarizados para la función del ácido del estómago y el alto costo más el suministro limitado de heptadecapéptido natural extraído, ICI Pharmaceuticals colaboró ​​con investigadores fisiológicos para lanzar un proyecto de desarrollo.

Al conjugar la -alanina protegida con Boc-al extremo amino del tetrapéptido activo, se construyó un derivado de pentapéptido más estable para resistir la rápida hidrólisis enzimática in vivo.

Síntesis química completa depentagastrinafue logrado por el grupo de investigación de Konturek en 1967, con ensayos in-in vitro y en animales que confirmaron su potencia de secretagogo ácido-equivalente a la gastrina nativa. El agente obtuvo la aprobación de comercialización en Europa el mismo año y desde entonces se ha convertido en el reactivo estándar de oro-para las pruebas de producción de ácido estomacal.

Posteriormente se otorgaron aprobaciones en Estados Unidos, Japón y China para la detección de gastrinoma y la evaluación de la función de las células parietales. A partir de la década de 1990, su aplicación se expandió a la investigación fundamental como un compuesto de herramienta farmacológica dirigido al receptor CCK-B, y hasta la fecha sigue siendo un compuesto de referencia clásico en farmacología digestiva.