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Verde claro SF Amarillento, fórmula molecular C37H37N2NaO9S3, CAS 5141-20-8, generalmente soluble en agua o ciertos solventes orgánicos como etanol, acetona, etc. Su solubilidad está influenciada por factores como la temperatura, el tipo de solvente y la concentración. La buena solubilidad hace que el SF verde brillante sea fácil de usar en solución, lo que facilita las operaciones de tinción y detección de fluorescencia. Como SF verde brillante en estado líquido o solución, su densidad y viscosidad se ven afectadas por factores como el tipo de disolvente, la concentración y la temperatura. En estado puro o de alta concentración, el SF verde brillante puede tener mayor densidad y viscosidad; En soluciones diluidas, estas propiedades físicas disminuirán correspondientemente. Las características más destacadas son su tono verde brillante y sus fuertes propiedades de fluorescencia. Bajo irradiación ultravioleta (UV), este tinte puede emitir una fluorescencia verde brillante y distintiva, lo que lo hace ampliamente utilizado en tinciones biológicas, etiquetado fluorescente, etiquetado de seguridad y otros campos.
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Fórmula química |
C37H34N2Na2O10S3 |
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Masa exacta |
808 |
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Peso molecular |
809 |
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m/z |
808 (100.0%), 809 (40.0%), 810 (13.6%), 811 (5.4%), 810 (5.1%), 810 (2.7%), 809 (2.4%), 810 (2.1%) |
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Análisis elemental |
C, 54,94; H, 4,24; norte, 3,46; Na, 5,68; O, 19,78; S, 11,89 |
Verde brillante SF (amarillo pálido), también conocido como verde ácido 5, verde brillante (amarillo pálido), verde brillante 2G, verde brillante S, verde brillante 2GN, verde ácido, amarillo verde claro SF, verde claro SF amarillo pálido, amarillo verde brillante, verde ácido SF,verde claro SF amarillento, etc., es un producto químico muy utilizado en múltiples campos.
1. Campo biológico
(1) Tinción citológica:
Comúnmente utilizado para contratinción en citología, especialmente en experimentos histológicos y de biología celular, para mejorar la visibilidad de las estructuras celulares. Puede mostrar claramente el citoplasma, los orgánulos y las estructuras celulares específicas, proporcionando a los investigadores información morfológica celular detallada.
(2) Alternativa en el procedimiento de Gomori:
En el método de tinción tricrómico de Gomori, se puede utilizar como sustituto del azul de anilina. La tinción tricrómica de Gomori es un método de tinción utilizado para la identificación del tipo de fibra muscular, lo que hace que el método sea más flexible y eficaz en condiciones específicas.
(3) Detección de proteínas:
También se utiliza para detectar proteínas, especialmente en experimentos bioquímicos y de biología molecular. Puede indicar la presencia y contenido de proteínas formando complejos específicos con ellas o cambiando de color.
(4) Tratamiento de enfermedades relacionadas:
Los estudios han demostrado que sus análogos pueden desempeñar un papel en el tratamiento de enfermedades asociadas con la apolipoproteína E (ApoE). Aunque la investigación en este campo aún se encuentra en sus primeras etapas, vale la pena prestar atención a sus posibles perspectivas de aplicación.
2. Campo médico
(1) Diagnóstico clínico:
Puede usarse para preparar reactivos de diagnóstico clínico para ayudar a los médicos en el diagnóstico temprano y el diagnóstico diferencial de enfermedades. Estos reactivos pueden indicar el estado de la enfermedad al detectar cambios de color u otras señales basadas en sus interacciones con biomoléculas o células específicas.
(2) Histopatología:
En el estudio de histopatología, la tinción de secciones de tejido se utiliza comúnmente para revelar la estructura del tejido y los cambios patológicos. Puede ayudar a los patólogos a diagnosticar enfermedades con mayor precisión y evaluar la gravedad y el pronóstico de la enfermedad.
3. Campo de investigación
Tiene una posición importante en el campo de la investigación científica, especialmente en biología e investigación médica.
Contratinción citológica: comúnmente utilizado como agente de contratinción en citología, puede mostrar claramente la estructura y morfología celular.
Sustituto del paso de Gomori: en el método de tinción de Gomori, se puede utilizar como sustituto del azul de anilina para la tinción de tejidos específicos.
Tinción de plasma: como agente de tinción de plasma, puede teñir el citoplasma de las células, lo que ayuda a observar y estudiar la estructura interna de las células.
Tinción de tejidos animales: en la tinción de tejidos animales, se utiliza comúnmente para teñir partes específicas del tejido animal, como músculos, tejido conectivo, etc.
Tinción comparativa: se puede comparar con hematoxilina u otros tintes nucleares para resaltar diferentes estructuras en el tejido.
Tinción de tejidos vegetales: en histología vegetal, se utiliza para teñir citoplasma y fibras, que pueden mostrar claramente la morfología y estructura de las células vegetales.
4. Investigación bioquímica
También juega un papel importante en la investigación bioquímica.
Reactivos bioquímicos: se pueden utilizar como reactivos de electroforesis, reactivos de cromatografía, reactivos de separación por centrifugación, reactivos de inmunoensayo, reactivos de etiquetado, reactivos de química de tejidos y otros reactivos bioquímicos para la separación, purificación y detección de biomoléculas.
Investigación cancerígena: también se utiliza en el estudio de carcinógenos para evaluar sus riesgos potenciales para la salud.
Aditivo para medio de cultivo: en cultivo microbiano, se puede utilizar como aditivo en el medio de cultivo para promover el crecimiento y la reproducción de microorganismos.
5. Diagnóstico médico
También tiene un valor significativo en el campo del diagnóstico médico.
Tinción histopatológica: en histopatología, se usa comúnmente para la tinción tricrómica de Masson de fibra de colágeno, tinción de Papanicolaou, tinción policromática citológica y tinción microbiológica de secciones de tejido para diagnosticar enfermedades y observar el proceso de las lesiones.
Investigación en neurociencia: se puede utilizar un método de tinción multicolor-para diferenciar las células secretoras pituitarias, lo que ayuda a estudiar la estructura y función del sistema nervioso.
Tinción inmunohistoquímica: en la tinción inmunohistoquímica, se puede utilizar como agente de tinción auxiliar para mostrar la distribución de antígenos o anticuerpos específicos.
6. Otras aplicaciones
Además de los campos antes mencionados, también tiene las siguientes aplicaciones.
Colorante para alimentos y bebidas: Es un colorante permitido para su uso en alimentos y bebidas, que puede dar a los alimentos un color verde brillante.
Insecticidas: En algunos casos, también se pueden utilizar como insecticidas para controlar el número y distribución de plagas.
Monitoreo ambiental: También se puede utilizar para el monitoreo ambiental, como pruebas de calidad del agua, evaluación de la contaminación del suelo, etc.
Información básica y preparación de materia prima
Materias primas para la producción deVerde claro SF Amarillentodebe someterse a un control estricto. Las materias primas principales incluyen N,N-dietilanilina (pureza mayor o igual al 99%, humedad menor o igual al 0,5%), 3-sulfobenzaldehído (pureza mayor o igual al 98%), ácido sulfúrico concentrado de grado industrial (concentración 98%), hidróxido de sodio (pureza mayor o igual al 96%) y dicromato de sodio (oxidante). El material auxiliar es una solución saturada de cloruro de sodio (para salar). Todas las materias primas deberán cumplir con los estándares industriales GB/T para evitar que las impurezas afecten el color y la uniformidad del teñido del producto.
Proceso de síntesis central
El proceso de síntesis se realiza en cuatro pasos, controlando la temperatura y el valor del pH durante todo el proceso:
Reacción de condensación:
Agregue ácido clorhídrico al recipiente de reacción para ajustar el pH del sistema a 1–2, luego agregue N,N-dietilanilina y 3-sulfobenzaldehído en una proporción molar de 1:1,2. Caliente la mezcla a 40-50 grados y revuelva a temperatura constante durante 3 a 5 horas para generar un intermedio de triarilmetano. Se debe introducir continuamente gas inerte (nitrógeno) durante la reacción para evitar la oxidación del intermedio.
Oxidación y Sulfonación:
Agregue lentamente una solución de dicromato de sodio al sistema, caliente a 60 a 70 grados para la oxidación durante 2 a 3 horas, luego agregue ácido sulfúrico fumante como agente sulfonante y caliente a 80 a 90 grados para la sulfonación durante 1 a 2 horas para introducir grupos de ácido sulfónico y mejorar la solubilidad en agua del producto. Se requiere una agitación uniforme durante la sulfonación para evitar la formación de subproductos-causados por el sobrecalentamiento local.
Neutralización y salazón:
Neutralice lentamente la solución de reacción a un pH de 7 a 8 con una solución de hidróxido de sodio al 40 % para generar sal disódica soluble en agua-. Después de reposar y enfriar a temperatura ambiente, agregar lentamente una solución saturada de cloruro de sodio y agitar hasta que precipite una gran cantidad de sólido. Después de reposar durante 4 horas para la precipitación, se filtra para obtener una torta de filtración cruda.
Purificación y Secado:
Lave la torta de filtración repetidamente con agua desionizada de 3 a 4 veces hasta que la solución de lavado sea neutra (sin residuos de iones cloruro). Luego coloque la torta en un horno de secado al vacío y séquela a 60-70 grados bajo un vacío de -0,08 ~ -0,09 MPa durante 8 horas. Después de triturar, tamizar a través de un tamiz de malla 80 para obtener el tinte terminado.
Estándares de control de calidad
El producto terminado debe pasar múltiples pruebas y cumplir con los estándares de la industria:
Requisitos de pureza: La pureza es un indicador fundamental que determina el poder colorante del tinte y el efecto de aplicación, y los métodos de detección están estandarizados según los grados del producto. Para el grado industrial general-verde claro SF amarillento, el contenido de colorante, cuantificado por espectrofotometría en la longitud de onda de máxima absorción (629–634 nm), no deberá ser inferior al 80 %. Para los productos de alta-tinción biológica-, que se utilizan en análisis microscópicos y detección clínica, se aplican criterios de pureza más estrictos: la pureza debe ser mayor o igual al 85 % (método espectrofotométrico) y la pureza de la cromatografía líquida de alto -rendimiento (HPLC) debe alcanzar mayor o igual al 99 %. Este estricto requisito de HPLC garantiza la ausencia de trazas de impurezas que puedan interferir con los resultados de la tinción o afectar la seguridad biológica.
Indicadores clave: Se prueban una serie de indicadores clave para garantizar la estabilidad y aplicabilidad del tinte en diversos escenarios. La longitud de onda de absorción máxima está estrictamente controlada dentro del rango de 629 a 634 nm, con una absorbancia mayor o igual a 0,85, lo que garantiza una intensidad de coloración y un rendimiento espectral constantes. El contenido de humedad no deberá exceder el 5% para evitar el apelmazamiento durante el almacenamiento y la degradación de la actividad del tinte; El contenido de cenizas se limita a menos del 3% o igual para reducir las impurezas inorgánicas que pueden afectar la solubilidad y la uniformidad de la tinción. En cuanto a los indicadores de seguridad, el contenido total de metales pesados (incluidos plomo, arsénico, mercurio y cadmio) debe ser inferior o igual a 10 ppm, cumpliendo plenamente con la norma nacional de aditivos alimentarios GB 2760, cumpliendo así con los requisitos de seguridad para aplicaciones de colorantes alimentarios y reactivos biológicos.
Prueba de estabilidad: Se realizan pruebas de estabilidad para verificar la durabilidad del producto en almacenamiento y su resistencia a condiciones adversas. En condiciones de almacenamiento estándar-envases sellados, ambiente oscuro y temperatura ambiente (20 a 25 grados)-el producto terminado deberá tener una vida útil de no menos de 2 años, sin cambios obvios en el color, la solubilidad o el rendimiento colorante. Para la prueba de estabilidad térmica, el producto se coloca en un ambiente de temperatura constante-a 60 grados durante 72 horas; después de la prueba, no habrá decoloración evidente y el poder colorante deberá permanecer mayor o igual al 95% del valor inicial, asegurando su adaptabilidad a ambientes de procesamiento o almacenamiento de alta-temperatura.
Normas de seguridad de producción y protección ambiental.
La producción debe cumplir con las GMP y los estándares de protección ambiental:
El taller está equipado con una torre de absorción de gases ácidos de cola para tratar los gases HCl y SO₂ generados durante la condensación y sulfonación, que se descargan según el estándar después de la neutralización con lejía.
Las aguas residuales de producción primero se ajustan a un pH de 6 a 9 en un tanque de neutralización, luego se tratan mediante precipitación por floculación y procesos bioquímicos, y se descargan solo cuando la DQO es inferior o igual a 50 mg/L y el croma es inferior o igual a 50 veces.
Los operadores deben usar ropa protectora-resistente a los ácidos, máscaras antigás y guantes protectores para evitar que el tinte entre en contacto con la piel y el tracto respiratorio.
El producto terminado debe envasarse herméticamente y almacenarse en un almacén fresco y seco, lejos de oxidantes, y no debe almacenarse junto con alimentos y productos farmacéuticos.
Verde claro SF AmarillentoTiene una amplia gama de aplicaciones en estudios de histología y patología como tinción histológica para colágeno.
Objetivo del estudio: observar y analizar la distribución y estructura del colágeno en los tejidos de la piel.
Método de tinción: tinción de secciones de tejido de piel con SF verde brillante.
Resultados: Después de la tinción, las fibras de colágeno mostraron un color verde distintivo, mientras que otras estructuras de tejido mostraron colores diferentes. Esto permite a los investigadores observar claramente la dirección, distribución y morfología de las fibras de colágeno y así analizar la estructura y función de los tejidos de la piel.
Aplicación: Los resultados de este estudio ayudan a comprender los cambios fisiológicos y patológicos del tejido de la piel, proporcionando una base importante para la investigación y el tratamiento de enfermedades de la piel.
Antecedentes: el crecimiento y la invasión de los tumores suelen estar estrechamente relacionados con los cambios estructurales de los tejidos circundantes, especialmente los cambios de las fibras de colágeno.
Método de tinción: se tiñeron secciones de tejido tumoral con SF verde brillante para observar la morfología y distribución de las fibras de colágeno.
HALLAZGOS: En los tejidos tumorales, la distribución y morfología de las fibras de colágeno sufrió cambios significativos, como engrosamiento, desorganización o rotura de las fibras. Estos cambios estuvieron estrechamente relacionados con el grado de malignidad, la agresividad y el pronóstico del tumor.
Aplicación: Mediante el análisis de las fibras de colágeno, los investigadores pueden evaluar la agresividad y el pronóstico de los tumores, proporcionando una referencia importante para el desarrollo de planes de tratamiento de tumores.
Objetivo del estudio: investigar los cambios de las fibras de colágeno en las enfermedades fibróticas y su relación con la progresión de la enfermedad.
Materiales experimentales: Muestras de tejido de pacientes con enfermedades fibróticas.
Procedimiento de tinción: tinción de muestras de tejido con SF verde brillante para observar la morfología y el número de fibras de colágeno.
Resultados: En las enfermedades fibróticas, el número de fibras de colágeno aumentó significativamente y la morfología cambió anormalmente. Estos cambios están estrechamente relacionados con la gravedad y la progresión de la enfermedad.
Aplicación: Este estudio ayuda a revelar la patogénesis de las enfermedades fibróticas y proporciona nuevas ideas y métodos para el diagnóstico y tratamiento de las enfermedades.
Antecedentes: el tejido óseo está compuesto principalmente de colágeno y minerales, y el colágeno juega un papel importante en la estructura y función del tejido óseo.
Método de tinción: las secciones de tejido óseo se tiñeron conVerde claro SF Amarillentopara observar la distribución y morfología del colágeno.
Resultados: Después de la tinción, las fibras de colágeno en el tejido óseo mostraron un color verde claro, lo que permitió a los investigadores observar con precisión la distribución y morfología del colágeno en el tejido óseo.
APLICACIONES: Los resultados de este estudio pueden ayudar a comprender los cambios fisiológicos y patológicos en el tejido óseo y proporcionar una base importante para la investigación y el tratamiento de enfermedades óseas.
En resumen, el SF verde brillante como colorante histológico para colágeno tiene una amplia gama de aplicaciones en la investigación de histología y patología. Mediante la observación y el análisis de la tinción, los investigadores pueden observar claramente la distribución, la morfología y los cambios estructurales de las fibras de colágeno y luego comprender el estado fisiológico y patológico de los tejidos, lo que proporciona una base importante para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades.
Preguntas frecuentes
¿Qué tiñe el verde claro sf?
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Light Green SF Yellowish es un tinte de triarilmetano verde. Se utiliza en histología para teñir.colágeno. Aparece como un polvo de color rojo pardusco-a violeta y es soluble en agua fría. Sinónimos: Verde ácido 5 ; Verde ácido rápido N ; Midori205.
¿Qué es el SF verde claro en la prueba de Papanicolaou?
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El SF verde claro es un colorante ácido que tiñe de verde el citoplasma de células metabólicamente activas, es decir, células escamosas intermedias, células parabasales, células endocervicales, histiocitos, leucocitos, células de carcinoma indiferenciadas y células de adenocarcinoma.
¿El color verde claro tiñe el citoplasma?
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Las estructuras en una sección de tejido se tiñen de la siguiente manera: las sales de calcio se tiñen de negro, los núcleos de rojo y el citoplasma de rosa.Si esta tinción se realiza con Verde Claro, las sales de calcio se teñirán de negro, los núcleos de un verde más oscuro y el citoplasma de verde..
¿El verde claro mancha el colágeno?
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El verde claro es el tinte estándar en Norteamérica para teñir el colágeno.en contraste con la fucsina ácida en el tricrómico de Masson. Es un componente de la serie EA de Papanicolaou junto con la eosina Y y el marrón Bismarck. También se utiliza ampliamente en histología vegetal.
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