BIS-TRIS tampón CAS 6976-37-0

Es un tampón biológico eficiente con un rango de tampón de pH efectivo de 5,8-7,2 y un valor de pKa de 6,5 (25 grados). En los experimentos bioquímicos, muchas biomoléculas, como proteínas y ácidos nucleicos, son muy sensibles a los valores de pH, e incluso pequeños cambios en el pH pueden afectar su estructura y función. BIS-TRIS puede estabilizar el valor de pH de la solución dentro de este rango de pH, proporcionando un entorno estable para reacciones bioquímicas. En el proceso de separación y purificación de proteínas, se puede mantener la conformación natural de la proteína para evitar la desnaturalización o precipitación debido a cambios de pH.

Por ejemplo, en técnicas de purificación de proteínas como la cromatografía de intercambio iónico y la cromatografía de afinidad, el uso deBIS-búfer TRISpuede garantizar que la interacción entre las proteínas y los medios de cromatografía se produzca en condiciones de pH estable, mejorando así la eficiencia y la pureza de la purificación.

En los ensayos de actividad enzimática, la actividad enzimática a menudo depende de un entorno de pH específico. El valor de pH del sistema de reacción se puede controlar con precisión para permitir que la enzima ejerza actividad catalítica en condiciones óptimas de pH, midiendo así con precisión la actividad de la enzima. Esto es de gran importancia para estudiar las propiedades, los mecanismos de acción y el desarrollo de preparaciones enzimáticas de enzimas.

BIS-TRIS tiene la capacidad de coordinarse con varios iones metálicos y formar complejos estables, como Zn ² ⁺ - BIS-TRIS, Mn ² ⁺ - BIS-TRIS, etc. Estos complejos de iones metálicos juegan un papel importante en el estudio de la estructura y función de las biomoléculas. En el análisis estructural de proteínas, los iones metálicos a menudo actúan como cofactores para participar en la formación de centros activos en proteínas. Al coordinar BIS-TRIS con iones metálicos, se puede estabilizar la estructura de los complejos de iones metálicos de proteínas, lo que facilita el uso de técnicas como la cristalografía de rayos X-y la resonancia magnética nuclear (RMN) para el análisis estructural.

Por ejemplo, los centros activos de ciertas enzimas que contienen zinc requieren iones de zinc para mantener su actividad catalítica, y los complejos BIS-TRIS Zn ² ⁺ pueden proporcionar un entorno estructural estable para estas enzimas, lo que ayuda a analizar con precisión sus estructuras tridimensionales-.

En la investigación de ácidos nucleicos, como la secuenciación de ADN, los iones metálicos también pueden participar en el plegamiento y la regulación funcional de los ácidos nucleicos. La coordinación entre BIS-TRIS y los iones metálicos puede regular el entorno local de los ácidos nucleicos, afectando las interacciones entre los ácidos nucleicos y las proteínas, moléculas pequeñas, etc., proporcionando una poderosa herramienta para-la investigación en profundidad sobre la estructura y función de los ácidos nucleicos.

BIS-TRIS tiene importantes aplicaciones en experimentos de electroforesis de proteínas. SDS-PAGE (electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio) y Native PAGE (electroforesis en gel de poliacrilamida no desnaturalizante) son técnicas comunes de electroforesis de proteínas.BIS-búfer TRISse utiliza a menudo para preparar un tampón de electroforesis para mantener la estabilidad del pH de la solución durante la electroforesis. En SDS-PAGE, las proteínas se desnaturalizan y se cargan negativamente en un tampón de muestra que contiene SDS y mercaptoetanol, y luego se separan por tamaño molecular en un gel de poliacrilamida.

Puede garantizar la estabilidad del valor de pH del tampón de electroforesis, permitiendo que las proteínas migren de la manera esperada en un campo eléctrico, separando así con precisión proteínas de diferentes pesos moleculares y detectando sus pesos moleculares relativos.

En Native PAGE, las proteínas mantienen su conformación natural para la separación electroforética. Su uso puede prevenir la desnaturalización de proteínas debido a cambios de pH, preservar la actividad natural y la información conformacional de las proteínas y ayudar a estudiar el estado natural y las interacciones de las proteínas.

La transferencia Western es una técnica experimental importante que se utiliza para detectar el nivel de expresión de las proteínas diana. El tampón Bis Tris propano se utiliza a menudo como tampón de transporte de proteínas en experimentos de inmunotransferencia.

Durante la transferencia de proteína del gel a la membrana, el tampón Bis Tris propano puede mantener un entorno de pH estable, asegurando que la proteína se transfiera a la membrana con la conformación y el estado de carga correctos. Esto es crucial para la posterior unión de anticuerpos y detección de señales.

Si las proteínas sufren desnaturalización o cambios conformacionales durante el proceso de transferencia, puede provocar que los anticuerpos no puedan reconocer con precisión la proteína objetivo, lo que afecta la precisión de los resultados experimentales. Por lo tanto, el tampón Bis Tris propano desempeña un papel crucial en los experimentos de inmunotransferencia, ya que ayuda a mejorar la sensibilidad y confiabilidad de los experimentos.

El cultivo celular es una tecnología importante en la investigación biomédica y el valor del pH del medio de cultivo celular tiene un impacto significativo en el crecimiento y el metabolismo celular. El tampón de propano BIS-TRIS se puede utilizar para la preparación de medios de cultivo celular para mantener un valor de pH estable durante el proceso de cultivo celular.

Los diferentes tipos de células tienen diferentes requisitos de pH, pero generalmente requieren crecimiento en un ambiente cercano al pH fisiológico (aproximadamente 7,2-7,4).

El tampón de propano BIS-TRIS puede amortiguar los cambios de pH del medio de cultivo durante el cultivo celular, prevenir las fluctuaciones de pH causadas por la acumulación de productos metabólicos, el intercambio de gases y otros factores, y proporcionar un entorno de crecimiento estable para las células. Esto es de gran importancia para el crecimiento normal, la proliferación y la expresión funcional de las células, ya que ayuda a mejorar la tasa de éxito del cultivo celular y la confiabilidad de los resultados experimentales.

La electroforesis de ácidos nucleicos es un método comúnmente utilizado para detectar la longitud y concentración de los ácidos nucleicos diana, incluida la electroforesis de ADN y ARN. Adecuado para experimentos de electroforesis de ácidos nucleicos, puede mantener la estabilidad del pH del tampón de electroforesis.

En la electroforesis de ácidos nucleicos, las moléculas de ácido nucleico migran bajo la acción de un campo eléctrico en función de su tamaño y propiedades de carga.

Puede garantizar la estabilidad del valor de pH de la solución durante la electroforesis, permitiendo que las moléculas de ácido nucleico migren de la manera esperada, separando así con precisión fragmentos de ácido nucleico de diferentes longitudes y detectando sus concentraciones. Esto es de gran importancia para investigaciones como la clonación de genes, el análisis de la expresión genética y la secuenciación de ácidos nucleicos.

BIS-TRIS también se puede utilizar para detectar la creatina quinasa. La creatina quinasa es una enzima importante que desempeña un papel crucial en el metabolismo energético de los músculos. La determinación de su actividad es de gran importancia para el diagnóstico de enfermedades musculares y la evaluación de lesiones deportivas. En el experimento de detección de creatina quinasa, la estabilidad del pH del sistema de reacción se puede mantener para garantizar que la enzima exhiba actividad catalítica en condiciones óptimas de pH. Al controlar con precisión el valor del pH, se puede mejorar la precisión y confiabilidad de la medición de la actividad de la creatina quinasa, lo que brinda un fuerte apoyo para el diagnóstico y la investigación clínicos.

BIS-TRIS también desempeña un papel importante en la investigación y aplicación de la hemoglobina. Durante el proceso de separación de la hemoglobina, se puede mantener su estabilidad y actividad para evitar la desnaturalización o agregación debido a cambios de pH. Esto es de gran importancia para la purificación y la investigación estructural de la hemoglobina.

BIS-TRIS puede proteger eficazmente la hemoglobina durante el proceso de liofilización-. La liofilización es un método comúnmente utilizado para conservar productos biológicos, pero las proteínas pueden dañarse durante el proceso de congelación y secado. Puede proporcionar un entorno estable para la hemoglobina durante el proceso de liofilización-, reducir la desnaturalización e inactivación de proteínas y mejorar la actividad y estabilidad de la hemoglobina después de la liofilización-.

IEF (electroforesis por enfoque isoeléctrico) y electroforesis en gel 2-D son técnicas comunes en la investigación proteómica, que se utilizan para separar y analizar mezclas complejas de proteínas. BIS-TRIS se puede utilizar como electrolito catódico para electroforesis en gel IEF/2-D.

Durante el proceso IEF, las proteínas migran y se concentran en un gradiente de pH basado en su punto isoeléctrico. El catolito BIS-TRIS puede mantener la estabilidad del pH del tampón de electroforesis, asegurando que las proteínas puedan migrar con precisión a su punto isoeléctrico durante el proceso de enfoque isoeléctrico. En la electroforesis en gel 2-D, el uso deBIS-búfer TRISTambién ayuda a mejorar el efecto de separación y la resolución de las proteínas, proporcionando datos de alta-calidad para la investigación proteómica.