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Ácido 8-anilino-1-naftalenosulfónico(ANS), fórmula molecular C6H5NHC10H6SO3H, con cristales en forma de aguja o de hoja de color verde grisáceo. Su sal de sodio es un cristal de color verde claro a gris con forma de aguja o de escamas. Insoluble en agua, soluble en etanol. Su sal de amonio hidratada tiene un punto de fusión de 242-244 grados. Es un tinte intermedio que se utiliza para producir negro BR débilmente ácido, azul profundo débilmente ácido 5R, así como tintes sulfurados y azoicos. Agentes de detección de fluorescencia para la investigación de proteínas. 1,8-ANS es un tinte fluorescente con alta afinidad por la superficie hidrofóbica de las proteínas. Después de experimentar un cambio al azul y un aumento significativo en la intensidad de la fluorescencia, 1,8-ANS se une a la superficie proteica de la región de baja polaridad 1,2. Estas propiedades hacen que el 1,8-ANS sea muy adecuado para medir la afinidad de ligandos hidrófobos y sus correspondientes proteínas de unión, como las proteínas de unión a ácidos grasos (FABP) con ácidos grasos libres hidrófobos 1,2,3. Cuando se combina con 1,8-ANS, el valor de Kd es ~9,7 µM (24,5 grados C) 2. Agentes de detección de fluorescencia para la investigación de proteínas. Intermedio de colorantes azoicos. Se utiliza para fabricar tintes ácidos como azul marino R, negro ácido débil BR, azul profundo ácido débil 5R, GR y verde brillante sulfurizado 7B.
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Fórmula química |
C16H13NO3S |
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Masa exacta |
299 |
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Peso molecular |
299 |
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m/z |
299 (100.0%), 300 (17.3%), 301 (4.5%), 301 (1.4%) |
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Análisis elemental |
C, 64.20; H, 4.38; N, 4.68; O, 16.03; S, 10.71 |
El ácido 8-anilino-1-naftenosulfónico (ANS), como importante colorante fluorescente, ha demostrado un amplio valor de aplicación en la investigación de proteínas. Sus propiedades de fluorescencia únicas y su alta afinidad por las superficies hidrofóbicas de las proteínas la convierten en una herramienta poderosa para estudiar la estructura, función e interacciones de las proteínas.
1. Como sonda fluorescente para detectar proteínas.
(1) Detección directa de proteínas.
Puede utilizarse directamente para la detección de fluorescencia de proteínas. Cuando se mezcla con proteínas, debido a su alta afinidad por la superficie hidrófoba de las proteínas, se une a las regiones no-polares de las proteínas, lo que produce un aumento significativo en la intensidad de la fluorescencia. Al observar cambios en las señales de fluorescencia, se puede lograr la detección de proteínas y el análisis cuantitativo. Este método tiene las ventajas de alta sensibilidad, operación simple y buena reproducibilidad, y tiene amplias perspectivas de aplicación en campos como la bioquímica y la biología molecular.
(2) Monitoreo de cambios conformacionales de proteínas.
Los cambios conformacionales de las proteínas son la base de su implementación funcional. Puede monitorear cambios en la conformación de proteínas en tiempo-real. Cuando una proteína sufre cambios conformacionales, las regiones hidrofóbicas de su superficie también sufren cambios, lo que afecta la señal de unión y fluorescencia de la sustancia. Por tanto, al observar los cambios en las señales de fluorescencia, se pueden inferir los cambios conformacionales de las proteínas. Esto es de gran importancia para comprender los mecanismos funcionales de las proteínas.
2. estudiar la interacción entre proteínas y ligandos
(1) Determinación de la afinidad
Puede utilizarse para determinar la afinidad entre proteínas y ligandos hidrofóbicos. Midiendo los cambios de intensidad de fluorescencia de la sustancia después de unirse a proteínas, se puede evaluar la fuerza de unión y el modo de unión entre ligandos y proteínas. Este método es particularmente adecuado para estudiar la interacción entre los ácidos grasos libres hidrófobos y las proteínas fijadoras de ácidos grasos (FABP) y otros sistemas.
(2) Exploración de las interacciones de unión a proteínas
También puede servir como molécula informadora o ligando competitivo, proporcionando nuevas direcciones para explorar las interacciones de unión entre proteínas y otras moléculas. Al mezclarlo con proteínas y observar cambios en las señales de fluorescencia, se puede revelar el mecanismo de interacción entre las proteínas y otras moléculas, lo que proporciona información importante para el desarrollo de fármacos, el tratamiento de enfermedades y otros campos.
3. Otros aspectos aplicados a la investigación de proteínas
(1) Etiquetado de proteínas
Puede usarse para marcar proteínas, especialmente aquellas con superficies hidrofóbicas. Al unirlo a proteínas y observar señales de fluorescencia, se puede rastrear la posición y distribución de las proteínas en experimentos, lo que resulta conveniente para la localización de proteínas y la investigación funcional.
(2) Estudiar el plegamiento de proteínas
El plegamiento de proteínas es un paso crucial en la adquisición de la función proteica. Puede utilizarse para controlar el proceso de plegamiento de proteínas. Durante el plegamiento de las proteínas, las regiones hidrofóbicas de su superficie sufren cambios que afectan la señal de unión y fluorescencia del producto. Al observar los cambios en las señales de fluorescencia, se puede comprender el proceso dinámico y el mecanismo del plegamiento de proteínas.
(3) Aplicación de glóbulos blancos fijos en cinco reactivos de células sanguíneas de clasificación
En el campo de las pruebas médicas, también se puede utilizar para la fijación de glóbulos blancos en cinco reactivos de células sanguíneas de clasificación. A través de sus características de fluorescencia, se puede lograr un etiquetado y fijación efectivos de los glóbulos blancos, proporcionando datos precisos para el posterior análisis y diagnóstico celular.
Proceso de teñido en tintes ácidos.
Como intermediario importante de los tintes ácidos, el proceso de teñido del ácido 8-fenilen-1-naftalenosulfónico tiene un impacto significativo en el efecto de teñido y la solidez de los tintes.
Antes de teñir, es necesario pretratar las fibras. Esto incluye eliminar impurezas y manchas de aceite de la superficie de las fibras, así como ajustar las condiciones de pH y temperatura de las fibras. Estos pasos de preprocesamiento pueden garantizar que el tinte pueda penetrar uniformemente en las fibras y mejorar el efecto y la solidez del teñido.
La selección de las condiciones de teñido tiene un impacto significativo en el efecto de teñido y la solidez de los tintes. Esto incluye factores como la concentración de tinte, la temperatura de teñido, el tiempo de teñido y el valor de pH. Al seleccionar las condiciones de teñido, es necesario considerar de manera integral factores como el tipo de fibra, las propiedades del tinte y los requisitos de teñido. Por ejemplo, para fibras proteicas tales como lana, se pueden elegir temperaturas de teñido más bajas y tiempos de teñido más largos; Para fibras sintéticas como el nailon, es necesario elegir temperaturas de teñido más altas y tiempos de teñido más cortos.
Una vez finalizado el teñido, es necesario-tratamiento posterior de las fibras. Esto incluye pasos como lavar, fijar y suavizar. El lavado puede eliminar tintes y aditivos que no se fijan en la superficie de las fibras; El color fijo puede mejorar la solidez de los tintes; La suavidad puede mejorar la sensación y la comodidad de las fibras. Estos pasos post-procesamiento pueden mejorar aún más el efecto y la calidad del teñido.
El método de síntesis deÁcido 8-anilino-1-naftalenosulfónicoincluye dos pasos de reacción: el primer paso es preparar ácido 8-naftalenosulfónico; el segundo paso es agregar anilina para preparar el producto. El proceso operativo específico de la reacción de dos pasos se presentará en detalle a continuación.
Paso 1: Preparación de ácido 8-naftalenosulfónico:
Pasos:
1. Agregar 83,108g de Naftaleno y 77,335g de CrO3 en la botella de nitración;
2. Agregue 244 ml de ácido nítrico de 3,4 mol/L, no lo agregue todo de una vez;
3. Vierta una cantidad muy pequeña de agua y use un alambique para destilar la sustancia hirviendo de color marrón rojizo-;
4. Mantenga la temperatura del agua por encima de 80 grados durante el proceso de destilación;
5. Cuando la destilación alcance el punto de ebullición, apague el calentador, diluya lentamente el ácido nítrico en el líquido neutralizador de alta-temperatura que es 3 veces la cantidad de la mezcla reactiva y revuelva al mismo tiempo;
6. Después de enfriar, lavar el producto bruto con 1 litro de agua;
7. Filtrar el producto bruto y recoger los cristales finos en la castaña;
8. Lavar los cristales con agua desionizada;
9. Recoger el ácido 8-naftalenosulfónico seco al vacío.
Paso 2: Preparación deÁcido 8-anilino-1-naftalenosulfónico:
Pasos:
1. Poner ácido 8-naftalenosulfónico en el matraz cónico;
2. Añadir 3,2 ml de anilina, 1 ml de ácido clorhídrico y 5 ml de agua desionizada y calentar a temperatura ambiente;
3. Luego agregue 5 ml de metanol y 5 ml de acetona y luego transfiera la mezcla al tubo de la copa de lavado;
4. Utilice chicle para llenar la abertura del tubo de lavado de vasos para evitar que entren sustancias distintas a la mezcla;
5. Posteriormente reaccionar en condiciones estándar, mantener la temperatura a temperatura ambiente y agitar;
6. Al final de la reacción, el producto se filtró al vacío y se lavó con una pequeña cantidad de metanol;
7. Secar el producto al vacío.
Los anteriores son los pasos operativos específicos, las precauciones y los materiales operativos del método de síntesis del producto. Se requiere una cierta base química y experiencia experimental para garantizar la seguridad y el éxito del proceso de operación.
Propiedades ópticas:
ANS tiene una propiedad fluorescente, es decir, emitirá una señal fluorescente después de ser excitado por la luz ultravioleta. La longitud de onda de excitación máxima de ANS es de 350 nm y la longitud de onda de emisión de fluorescencia máxima es de 456 nm, que se puede utilizar para medir la conformación espacial y la fuerza iónica de biomacromoléculas mediante fluorescencia. Además, la intensidad de fluorescencia de ANS se vio afectada por el valor de pH, y la intensidad de fluorescencia fue máxima cuando el valor de pH era 4,5.
En resumen, ANS es una molécula hidrófila con alto punto de fusión y punto de ebullición, soluble en agua y disolventes orgánicos, tiene propiedades fluorescentes y puede utilizarse en análisis e investigaciones biológicas.
Todo lo que necesitas saber
¿Qué es el ácido 8 anilino 1 naftaleno sulfónico?
El ácido 8-anilinonaftaleno-1-sulfónico es un ácido naftalenosulfónico que seácido naftaleno-1-sulfónico sustituido por un grupo fenilamino en la posición 8. Tiene una función como sonda fluorescente. Es un aminonaftaleno y un ácido naftalenosulfónico.
¿Para qué se utiliza el ácido naftalenosulfónico?
-El condensado de formaldehído de ácido naftalenosulfónico es un tipo de dispersante con buenas propiedades, como humectante, emulsionante y dispersante. Es ampliamente utilizado comodispersante de recubrimiento, dispersante de tinte, reductor de agua de cementoetcétera.
¿Cuáles son los peligros de la sal de amonio del ácido 8 anilino 1 naftalenosulfónico?
Indicaciones de peligroH315 Provoca irritación cutánea. H319 Provoca irritación ocular grave. H335 Puede provocar irritación respiratoria. Consejos de prudencia P261 Evitar respirar el polvo/el humo/el gas/la niebla/los vapores/el aerosol.
¿Para qué sirve el reactivo ANSA?
Como sonda fluorescente, ANS puede unirse específicamente a la región hidrofóbica de las proteínas (como las proteínas de membrana) y monitorear la dinámica de la conformación de las proteínas a través de cambios en las señales fluorescentes. Es ampliamente utilizado enInvestigación bioquímica y desarrollo de materiales antibacterianos..
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