tetrametilbencidina(TMB) es una sustancia química con la fórmula molecular de C16H20N2; [- C6H2 (CH3) 2-4-NH22] 2 es una tinción para la peroxidasa y el antígeno de la hepatitis B. Polvo blanco a amarillo. TMB se utiliza como sustrato de catalasa en la reacción ELISA. El sustrato puede producir productos finales solubles de color azul claro, que se pueden leer con un espectrofotómetro a 370 o 620-650 nm. La reacción de TMB se puede terminar con H2SO4 2 M (amarillo) y se puede leer a 450 nm. Por lo tanto, TMB es un reactivo sensible y específico para la determinación de sangre, hemo y peroxidasa.
Fórmula química |
C16H20N2 |
Masa exacta |
240 |
Peso molecular |
240 |
m/z |
240 (100,0 por ciento), 241 (17,3 por ciento), 242 (1,4 por ciento) |
Análisis elemental |
C, 79.96; H, 8.39; N, 11.66 |
tetrametilbencidinaes un reactivo cromógeno nuevo y seguro. En comparación con los reactivos cromógenos tradicionales como bencidina, o-toluidina y o-fenilendiamina, TMB tiene las ventajas de una alta sensibilidad de detección, buena estabilidad y uso seguro. Los resultados de la prueba con animales y la prueba de variabilidad automática bacteriana Ames mostraron que TMB no era carcinógeno ni mutágeno. En la actualidad, TMB ha ido reemplazando gradualmente a la bencidina carcinógena fuerte y otros derivados de bencidina carcinógenos, y se ha aplicado en laboratorios clínicos, exámenes forenses, detección criminal, monitoreo ambiental y otros campos. Especialmente en pruebas bioquímicas clínicas, TMB, como un nuevo sustrato de la peroxidasa, ha sido ampliamente utilizado en inmunoensayo enzimático (EIA) y ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).
Los principales elementos de aplicación detetrametilbencidinason como sigue:
1. La detección de huellas dactilares es el método más efectivo para mostrar huellas dactilares de sangre latentes en la seguridad pública
2. Detección rápida de alcohol en saliva
3. Preparación del papel de prueba de orina.
4. Detección del virus de la hepatitis
5. Prueba de detección de embarazo
6. Determinación rápida de glucosa, hemoglobina y albúmina en sangre y orina.
7. Prueba de sangre oculta en heces
8. Determinación del valor de granulocitos en sangre
9. Detección de esteroides y hormonas sexuales
10. Determinación de la actividad enzimática
11. Análisis y detección de antígenos, anticuerpos y material genético
12. Teñido de muestras biológicas
13. Prueba de calidad del agua
14. Estándar para la determinación de aminas aromáticas liberadas por colorantes azoicos en productos básicos.
Un método de preparación detetrametilbencidina, los pasos específicos son:
(1) Agregue 2,6 - dimetilanilina al etanol anhidro, agregue una solución de agua desionizada con catalizador y reaccione a una temperatura inferior a 35 grados, luego deje caer el oxidante y extraiga el sólido para obtener 2,6 - dimetilanilina activada;
(2) Agregue la solución de tetrahidrofurano disuelta con 2,6 - dimetilanilina activada a la solución acuosa de cloruro de amonio y luego agregue ácido acético glacial y catalizador metálico. Una vez completada la reacción, separe la capa de tetrahidrofurano y agréguela a la solución de ácido clorhídrico y filtre el sólido para obtener el producto bruto de 3,3,5,5 - tetrametilbifenilo;
(3) Agregue el producto crudo de 3,3,5,5 - tetrametilbifenilo al metanol, agregue zinc en polvo, caliente hasta 50 - 70 grados para que reaccione, filtre mientras está caliente, concéntrese y agréguelo al etanol, continúe calentando durante disolución y concentrar el filtrado después de la filtración para obtener el producto puro de 3,3,3,5,5 - tetrametilbifenilo.
El método no solo es efectivo y simple, y evita el uso de materias primas peligrosas, sino que también tiene un alto rendimiento de producto y es adecuado para la producción industrial.
tetrametilbencidinaes un importante reactivo cromógeno. En comparación con el reactivo cromógeno tradicional (como la bencidina), tiene las ventajas de una alta sensibilidad de detección y una buena estabilidad, y es seguro de usar, sin efectos cancerígenos ni mutagénicos. En la actualidad, TMB ha ido sustituyendo paulatinamente al tradicional reactivo cromógeno y se aplica en laboratorio clínico, examen forense, detección de delincuentes y vigilancia ambiental. Especialmente en pruebas bioquímicas clínicas, la TMB, como nuevo sustrato de la peroxidasa, ha sido ampliamente utilizada en inmunoensayos enzimáticos y ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas. Pero su precio es elevado, por lo que es muy importante estudiar su método de síntesis.
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