Bremelanotida(enlace:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/bremelanotide-powder-cas-189691-06-3.html) es una hormona polipeptídica sintética cuya estructura es similar a la leptina, la tirosina y la melanina de la piel que existen naturalmente en el cuerpo humano. Como nuevo tipo de fármaco, la bremelanotida tiene una función reguladora y se utiliza a menudo en el tratamiento de la disfunción eréctil y la libido baja. Los escenarios de uso en la vida diaria son cada vez más extensos. Con la investigación en profundidad sobre él, la gente ha descubierto muchos tipos de sus métodos de síntesis, que se analizarán uno por uno a continuación.
1. Sintetizado a partir de L-tirosina:
En el método de síntesis original, la estructura de la bremelanotida se obtenía deformando la L-tirosina. Primero, la L-tirosina se convierte en dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH) en presencia de ácido fluorhídrico, donde Boc representa el grupo succinimidometilo (t-butoxicarbonilo). A continuación, agregue alcohol bencílico (PhCH2OH), 1-(3-dietilaminopropoxi)-2-(2-metazolil)etano (EDC) y N-hidroxibutanodiol en reactivos de tetrahidrofurano (THF). como la imida (HOBt) puede combinar dipeptidil-L-tirosina con el pseudopéptido alanina (Phe-Aib-Aib-Lys(Ac)-Gly-Lys(Ac)-Aib-Leu-NH2) que se sintetizó en Bremelanotida.
(1) Conversión de L-tirosina en dipeptidil-L-tirosina:
Primero, disuelva la L-tirosina en agua y agregue la cantidad adecuada de ácido fluorhídrico. Normalmente, la concentración de L-tirosina es 1 M y la cantidad de ácido fluorhídrico es 5-10 %. La mezcla se dejó reposar a 0-4 grados durante 1 hora y luego se enfrió.
A continuación, el complejo de L-tirosina-ácido fluorhídrico obtenido se añadió gota a gota a tetrahidrofurano. Al mismo tiempo, se añadió al tetrahidrofurano una cantidad apropiada de reactivos de reacción tales como alcohol bencílico, EDC y HOBt. Después de reposar durante 2 horas con agitación, se puede obtener dipeptidil-L-tirosina (Boc-Tyr(OCO)2-OH).
(2) Reacción de dipeptidil-L-tirosina con pseudopéptido alanina:
Disolver la dipeptidil-L-tirosina obtenida en N,N-dimetilformamida (DMF) y añadir el pseudopéptido alanina. Las condiciones de reacción incluyen temperatura, tiempo de reacción y concentración de reactivos, etc. Estos factores afectarán el rendimiento y la pureza del producto. A una concentración de 225 g/l, la proporción de Boc-Tyr(OCO)2-OH a pseudopéptido alanina fue de 1:30.
Después de agitar y reposar en -N,N-dimetilformamida durante 24 horas, la solución de reacción se vertió en agua helada y se precipitó con una solución ácida de aldehído. El resultado es el producto final de Bremelanotida.
El método de síntesis tiene principalmente las siguientes ventajas: alta pureza del producto y proceso de producción sencillo. Pero este método también tiene algunas desventajas, como el consumo de tiempo, el alto costo, etc.
2. Síntesis en fase sólida:
La síntesis en fase sólida es actualmente uno de los métodos sintéticos más utilizados para la bremelanotida y también es un método sintético importante en el campo de la síntesis de péptidos. En los métodos en fase sólida, las cadenas polipeptídicas se construyen mediante adiciones sucesivas de unidades de aminoácidos. Primero, la primera unidad de aminoácido se modifica en un grupo protector de N estéricamente restrictivo y no degradable (como Fmoc), que luego se une al medio poroso. A continuación, mediante la introducción del grupo protector del ácido acrílico, la reacción de acilación y otros pasos, se añade cada unidad de aminoácido al medio poroso y se construye gradualmente una cadena polipeptídica completa. Finalmente, en las etapas de eliminación del grupo protector N, desnitrificación, etc., se puede preparar una cadena polipeptídica de bremelanotida con una secuencia específica.
El método de síntesis en fase sólida tiene principalmente las siguientes ventajas: alta eficiencia y alta tasa de utilización de materias primas. Pero este método sintético también tiene algunas desventajas, como que se requieren múltiples pasos de secado y lavado en el proceso de producción, y estos pasos conducirán a una disminución en la calidad del producto.
3. Síntesis en fase líquida:
La síntesis en fase líquida es otro método de síntesis de bremelanotida, que se lleva a cabo mediante un sistema de reacción líquido. Los pasos principales del método de síntesis incluyen la selección de la materia prima, el diseño de la molécula del fármaco, la selección de la ruta de síntesis, la reacción, la purificación y similares. En comparación con la síntesis en fase sólida, el método de síntesis en fase líquida puede obtener bremelanotida con mayor pureza y actividad biológica. En el método de síntesis en fase líquida, los reactivos de reacción comúnmente utilizados son dihidroxietilmercaptano (EDT), agente etoxicarbonilante (EEDQ), cloruro de tioacetilo, etc.
El método de síntesis en fase líquida tiene principalmente las siguientes ventajas: funcionamiento sencillo y alta pureza del producto. Sin embargo, este método de síntesis también tiene algunas desventajas, como un período de síntesis más largo y un mayor costo.
4. Síntesis fisicoquímica:
En el método de síntesis fisicoquímica, la bremelanotida se sintetiza mediante métodos físicos y químicos. Este método tiene principalmente dos enfoques diferentes: uno es realizar la síntesis de bremelanotida mediante operaciones repetidas de transformación de fase sólido-líquido; el otro es promover el autoensamblaje y la polimerización de cadenas polipeptídicas mediante compresión física y mecánica, sintetizando así bremelanotida.
Mecanismo de reacción:
La síntesis de bremelanotida se realiza principalmente convirtiendo L-tirosina en acilato L-fenólico, luego sintetizando el acilato L-fenólico y el pseudopéptido, y finalmente obteniendo el producto. El mecanismo de la reacción es el siguiente:
(1) Conversión de L-tirosina en L-fenol acilato:
La L-tirosina reacciona con azida sódica en una solución de THF para generar acilato de L-fenol. La azida de sodio convertirá el grupo hidroxilo de la tirosina en un grupo azida, y luego el tratamiento ácido convertirá el grupo azida en un acilato fenólico.
(2) El acilato de L-fenol se convierte en cloruro de ácido:
El acilato L-fenólico reacciona con el cloruro de acetilo en THF para producir cloruro ácido. Cinco veces la cantidad de TBHS debe absorber el HCl generado. Los cloruros de ácido son intermediarios de reacción que se requieren para reacciones posteriores.
(3) Síntesis de cloruro de ácido y pseudopéptido:
El cloruro de ácido intermedio reacciona con el pseudopéptido de DMF para generar la cadena polipeptídica de bremelanotida. Lo que sucede en este paso es una reacción de condensación de anhídrido, en la que HOBt es el catalizador.
(4) Purificación y análisis del producto:
El producto final también debe purificarse y analizarse para garantizar la pureza y calidad del compuesto.
El método de síntesis fisicoquímica tiene principalmente las siguientes ventajas: operación simple y período de preparación corto. Sin embargo, este método de síntesis también tiene algunas desventajas, como una baja pureza del producto y una diversidad de producto insuficiente.
En conclusión, los métodos de síntesis de bremelanotida son diversos y flexibles, y la selección depende de muchos factores, como las condiciones de reacción, el costo de síntesis y el tiempo de reacción, etc. Independientemente del método utilizado, las condiciones de reacción estables y los productos de alta pureza son los Claves para la síntesis exitosa de Bremelanotida.